في الرابع والعشرين من مارس عام 1530 نكبت طرابلس بتسليمها إلى فرسان القديس يوحنا وذلك بأن وقع الإمبراطور شارل الخامس رأس الإمبراطورية الرومانية المقدسة وملك أسبانيا مرسوم التخلي عنها هي ومالطا لمنظمة الفرسان.
وقد تم التوقيع في شمال إيطاليا ببلدة تدعى كاستيلو فرانكو فينيتو حملت اسمها بسبب القلعة الظاهرة في الصورة.
وقد فرض الامبراطور على المنظمة مقابلا رمزيا لذلك وهو أن يقدموا إليه كل عام صقرا عند الاحتفال بعيد جميع القديسين. وبذلك انقضى عهد الاحتلال الإسباني المباشر لطرابلس وبدأ عهد حكم فرسان القديس يوحنا وسيمتد لأكثر من عشرين سنة.